什么是高效液相色谱

 一、什么是高效液相色谱（HPLC）？

• 适用范围广：既能检测小分子有机物，也能分析中等分子质量的生物活性物质，覆盖两大领域多数检测需求。
• 分离效率高：依托高效固定相和高压输液系统，可在短时间内实现复杂样品的多组分分离，比如10分钟内完成精细化工成品中4-6种杂质的分离检测。
• 检测灵敏度高：搭配紫外、荧光等高灵敏度检测器，能检出微克级甚至纳克级的痕量成分，避免因微量残留物、杂质影响产品质量或安全性。
• 结果稳定可靠：流动相流速、柱温等参数可精准控制，同一样品多次检测结果偏差小，为研发数据验证、生产质控提供稳定依据。

1. 样品注入：将待检测样品通过进样器精准注入色谱系统，确保样品无污染、注入量准确。
2. 流动相输送与分离：高压泵将流动相（通常是特定比例的混合液体溶剂）以稳定的压力（10-40MPa）和流速输送至色谱柱。当样品随流动相进入色谱柱（柱内填充的固体颗粒为固定相）时，样品中不同成分因与固定相、流动相的相互作用（吸附、溶解、排斥等）强度不同，移动速度产生差异——与固定相亲和力强的成分移动慢，亲和力弱的成分移动快，最终实现“逐一分开”。
3. 检测器检测与数据输出：分离后的各成分依次进入检测器，检测器根据成分特性（如紫外吸收强度、荧光信号）产生电信号，信号经数据处理系统转化为“色谱图”（横坐标为时间，纵坐标为信号强度）。通过色谱图的保留时间（判断物质种类）、峰面积/峰高（计算物质含量），即可完成样品分析。

1. 高压输液泵：HPLC的“动力源”，负责以稳定压力和流速输送流动相，确保流动相均匀连续，是分离效果稳定的核心保障。
2. 进样器：相当于“样品入口”，能精准定量注入样品，避免样品污染或注入量误差，减少检测结果偏差。
3. 色谱柱：HPLC的“分离核心”，柱内固定相（如硅胶颗粒、聚合物微球）的种类需根据检测需求选择（如检测极性成分选反相柱，检测离子型成分选离子交换柱）。
4. 检测器：HPLC的“信号捕捉器”，常用类型包括：
   紫外-可见检测器：适用于有紫外吸收的成分（如多数精细化工有机物、生物化工中的芳香族化合物）；
   示差折光检测器：适用于无紫外吸收的物质（如部分糖类、醇类原料）。
5. 数据处理系统：相当于“大脑”，将检测器输出的电信号转化为色谱图，自动计算保留时间、峰面积，最终生成直观的检测报告。